包括傳統開腹手術、進展到腹腔鏡手術，還有現在最流行的達文西機械手臂，尤其適合治療攝護腺癌。 如申請專利範圍第1項所述的用途，其中該醫藥組成物包含一醫藥學上可接受之賦形劑、載劑、輔劑及/或食品添加劑。 一種戈氏副擬桿菌用於製備一治療肺癌之醫藥組成物的用途，其中該戈氏副擬桿菌的寄存編號為BCRC 。
目前用來治療癌症的標準方法如下：手術切除、化學藥物治療、放射線治療、免疫治療及生物性治療等；在這些方式中，以手術切除及化學藥物治療最常被採用。 4.荷爾蒙療法：單獨使用僅能壓制癌細胞，無法根治，治療方式包含定期施打荷爾蒙針，一次性切除雙側睪丸，有時會伴隨合併經尿道攝護腺切除術。 利用放射線照射攝護腺，破壞分裂繁殖的癌細胞，屬於根治性治療，可合併荷爾蒙療法。 但放射線可能照射到攝護腺周邊組織，常見為膀胱和直腸，傷及膀胱黏膜及直腸黏膜，3～5年後可能大、小便出血。 格里森分數愈高，代表腫瘤的分化愈差，因此當格里森分數大於8分時，患者較可能出現轉移，存活率也較差。 在台灣，約有一半被診斷攝護腺癌的患者屬於第三期或第四期攝護腺癌，可能已有淋巴轉移或遠端轉移的狀況。
化學藥物治療: TWI406658B - 使用異硫氰酸酯類來治療癌症之方法及用途
在以下實驗中，對C57BL/6J雄性小鼠在尾靜脈中注射路易氏肺癌細胞(1×106細胞)，然後在整個實驗過程中監測腫瘤的生長及體積。 化學藥物治療2023 在一較佳實施方式中，可透過本發明兩種化合物之任一種進行治療的癌症是CML，特別是對美國藥物管理局核准之基利克膜衣錠(活性成分為伊馬替尼)具有抗性的CML癌細胞。 在另一實施例中，可透過本發明兩種化合物之任一種進行治療的癌症是胰臟癌，其預斷性差且對於患有局部晚期胰臟癌或是胰臟癌已轉移的患者來說，平均存活時間分別只有約10個月及6個月。
利用已知可干擾有絲分裂細胞中微管形成的有絲分裂抑制劑－諾可唑(nocodazole，用量100 nM)作為陽性對照組。 總結來看，本實施例的各項結果顯示在經過I7457與I7557治療的抗藥性CML細胞中，有絲分裂現象受到了抑制。 戈氏副擬桿菌菌株MTS01在增加帶有肺癌之小鼠的平均存活時間上的效用評估 本實施例中使用的實驗動物、戈氏副擬桿菌、迪氏副擬桿菌及路易氏肺癌之種類及培育方式是相同於實施例1所記載者。 如請求項15所述之方法，更包含在施用該有效量如請求項9所述之6-甲基磺醯己基異硫氰酸酯或其藥學上可接受鹽類之後，再對該胰臟癌施以放射線處理。 6-甲基磺醯己基異硫氰酸酯(6-methylsulfonylhexyl isothiocyanate)於製造用以治療癌症之醫藥品的用途，上述癌症係選自由胰臟癌、慢性骨髓白血病、非小細胞肺癌及食道癌所組成之群組。 如請求項7所述之方法，更包含在施用該有效量如請求項1所述之6-甲基亞磺醯己基異硫氰酸酯或其藥學上可接受鹽類之後，再對該胰臟癌施以放射線處理。
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在另一些實施方式中，本發明化合物的含量佔整體藥學組合物重量的至少10%(重量%)。 在又另一些實施方式中，本發明化合物的含量佔整體藥學組合物重量的至少25%(重量%)。 如所述，抗藥性是指癌細胞的一種狀態，尤指對單一治療性藥劑發展出抗性。 舉例來說，癌細胞可能會對諸如敏畢瘤、敏克瘤和溫諾平之類的長春花生物鹼類；諸如阿黴素、丹阿黴素及艾達黴素之類的蒽環黴素；微管蛋白安定藥物(紫杉醇)或酪胺酸激酶活性抑制劑(如，達沙替尼、尼祿替尼和伊馬替尼)發展出抗藥性。
- 在美國三種最常見的非小細胞肺癌為肺腺癌/支氣管肺泡癌(35~40%)、鱗狀細胞癌(25~30%)及大細胞肺癌(10~15%)。
- 然而，上述治療方式往往會產生副作用，例如化學藥物治療會使病患噁心、嘔吐，嚴重者會有感染及易出血的問題，放射線治療亦會使病患噁心、嘔吐，嚴重者會有掉髮問題。
- 也可使用脂肪酸(如，油酸)及其之甘油酯衍生物，或是天然藥學可接受的油(如，橄欖油或菜籽油)來製造可供注射用的溶液或懸浮液。
- 本實施例的結果顯示，本發明戈氏副擬桿菌菌株MTS01在活體內不同時間點皆具有抗肺癌效用。
- 本發明之6-甲基亞磺醯己基異硫氰酸酯化合物較佳是自山葵中分離而得。
美國與台灣食藥署核准這樣特徵的病人透過荷爾蒙合併其他藥物治療，進而延長有效治療的時間和整體存活，並且提升生活品質。 5.化學藥物治療：在荷爾蒙療法失去抗性後，開始實施化學藥物治療，攝護腺癌的化療相對其他疾病而言更加單純，僅有一兩種藥物注射為主。 如申請專利範圍第1項所述之用途，其中該醫藥組成物的劑型係係一噴霧氣體、一溶液、一半固態、一固態、一明膠膠囊、一軟膠囊、一錠劑、一口含片、一口香糖及/或一冷凍乾燥粉末製劑。
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然而，與病理對照組相較之下，實驗組小鼠的肺腫瘤數目有顯著的減少。 本實驗結果顯示，本發明戈氏副擬桿菌菌株MTS01可抑制肺腫瘤生長。 一種用來延緩活體外多數癌症細胞生長的方法，包含施用一有效量如請求項9所述之6-甲基磺醯己基異硫氰酸酯或其藥學上可接受鹽類，其中該癌症為胰臟癌、慢性骨髓白血病、非小細胞肺癌或食道癌。 一種用來延緩活體外多數癌症細胞生長的方法，包含施用一有效量如請求項1所述之6-甲基亞磺醯己基異硫氰酸酯或其藥學上可接受鹽類，其中該癌症為胰臟癌、慢性骨髓白血病、非小細胞肺癌或食道癌。 對81T/VGH細胞而言，細胞存活率分析結果顯示，經過20μM 之I7457與I7557處理48小時後，相較於對照組細胞，兩化合物均能夠有效地減少癌細胞數目至少50%(表5)。
細胞週期分析進一步顯示出有至少60%的CML細胞停滯於G2/M期，且處於亞G1(sub-G1)群的細胞族群會隨著I7457或I7557劑量增加而增加(參見表1)。 只有在細胞存活時，才能進行這種還原作用；因此通常會利用MTT分析來評估細胞存活與增殖的能力。 簡言之，使細胞和10或20 μM的試驗化合物(如，I7457 or I7557)接觸48或72小時；之後加入MTT染料(500 μg/ml)，並讓還原反應進行4小時；而後加入500 μl的異丙醇以終止還原反應。 所述實施方式與專有名詞是為了闡述發明內容之用，並非用以限制本揭示內容範疇。 本揭示內容範疇也涵蓋並未特意揭示於此，但習知技藝人士在閱讀過本揭示內容後可輕易推知的其他實施方式。
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6-甲基亞磺醯己基異硫氰酸酯(6-methylsulfinylhexyl 化學藥物治療2023 isothiocyanate)於製造用以治療癌症之醫藥品的用途，上述癌症係選自由胰臟癌、慢性骨髓白血病、非小細胞肺癌及食道癌所組成之群組。 實施例3 I7457與I7557增強人類胰臟癌細胞對放射線處理之感受性 在本實施例中，發明人探究了本發明化合物I7457與I7557，對胰臟癌細胞株Panc-1及BxPc-3接受放射線處理的感受性之影響。 在此處「個體」或「患者」等詞係指可接受所述化合物和/或方法治療的動物，包括人類。
所製造出來的醫藥品或是藥學組合物會包括一藥學有效量之I7457或是I7557或是其藥學上可接受的鹽類；以及一藥學上可接受的輔劑。 在某些實施方式中，所述方法更包含在對該個體施用I7457或是I7557的同時、之前或之後，也對該個體施用另一種已知可改善癌症治療效果的藥劑。 治療的首要目標是要在不傷及身體其他部位的情況下，將癌細胞完全移除。 但由於癌細胞極易侵犯周圍組織或是透過微遷移而轉移至身體其他遠端部位，致使手術切除癌細胞的應用層面受到限制。
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然而，與病理對照組相較之下，實驗組小鼠的體重增加 隨著同時餵食本發明戈氏副擬桿菌菌株MTS01而有顯著的增加，而比較組的小鼠則無此現象。 本實施例的結果顯示，本發明戈氏副擬桿菌菌株MTS01可有效地改善LLC引起的個體體重減輕的問題。 該小鼠係飼養在無特定病原體的設施中，並按照美國國立衛生研究院的指導原則進行治療。
因此，本揭示內容第一態樣是提供一種可用來治療一個體之癌症的方法。 所述方法包含對該個體施用一治療有效量的I7457或是I7557或是其藥學上可接受的鹽類。 適合以本發明化合物進行治療的癌症是選自胰臟癌、慢性骨髓白血病、非小細胞肺癌(non-small-cell lung carcinoma,NSCLC)及食道癌組成的群組中。 在一較佳實施方式中，上述CML乃是對伊馬替尼(imatinib，以此為活性成分之抗癌藥物的商品名為基利克膜衣錠)具有抗性的CML癌細胞。 所述方法包括對該個體施用一治療有效量的上述兩種化合物之一或是其藥學上可接受的鹽類。
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使用H&E染 色的肺部切片進行全玻片掃描及500μm或250μm光學變焦的代表性影像。 為了研究戈氏副擬桿菌對改善LLC引起的體重減輕的影響，在實驗期間的4週內每週監測各組小鼠的體重。 體重增加的計算公式為最終體重(4週)減去起點體重(0週)。 本實施例中所用之戈氏副擬桿菌(Parabacteroides goldsteinii,P.goldsteinii)MTS01是一種能治療肺癌的益生菌株。 該戈氏副擬桿菌是寄存於德國微生物菌種保存中心；民國107年10月29日；編號DSM 32939；以及寄存於食品工業發展研究所；民國108年2月15日；編號BCRC 。 戈氏副擬桿菌為絕對厭氧細菌，需於37℃之無氧培養箱培養約48小時；其中，該系統包含10%的二氧化碳、10%的氫氣、及80%的氮氣。
在某些實施方式中，本發明化合物的量至少約為該藥學組合物總重量的1%。 在特定實施方式中，本發明化合物的量至少約為該藥學組合物總重量的5%。 化學藥物治療2023 在其他實施方式中，本發明化合物的量至少約為該藥學組合物總重量的10%。
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目前用於治療肺癌的主要方式包括手術治療、放射線治療、化學藥物治療、標靶治療、及合併治療。 然而，上述治療方式往往會產生副作用，例如化學藥物治療會使病患噁心、嘔吐，嚴重者會有感染及易出血的問題，放射線治療亦會使病患噁心、嘔吐，嚴重者會有掉髮問題。 此外，傳統治療方式往往價格昂貴，並非為一般患者所能負擔。 為了解決上述問題，本領域的技術 人員亟需研發出具有治療肺癌功效之新穎醫藥品或食品產品以造福有此需求的廣大族群。
在較佳實施方式中，可經由口服方式(如，透過食物)將本發明化合物投予個體。 此藥學組合物包括一治療有效量之上述本發明化合物；以及一藥學上可接受的輔劑。 因此，本揭示內容第二態樣是提供上述I7457或是I7557的新穎用途，其可用來製造一種可治療癌症的醫藥品或是藥學組合物。
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因此，可將這兩種異硫氰酸酯類化合物，作為能治療癌症之醫療藥劑的先導化合物。 使用異硫氰酸酯類來治療癌症之方法及用途 化學藥物治療 本揭示內容是有關於某些小分子的新穎用途，特別是異硫氰酸酯類化合物的新穎用途，其可用來製造能治療癌症的醫藥品或藥學組合物。 綜上所述，本發明戈氏副擬桿菌可藉由增加帶有肺癌之個體的存活率、平均存活時間、及體重，並抑制肺腫瘤生長，達到治療肺癌之功效。 戈氏副擬桿菌菌株MTS01在抑制肺腫瘤生長上的效用評估 本實施例中使用的實驗動物、戈氏副擬桿菌、迪氏副擬桿菌及路易氏肺癌之種類及培育方式是相同於實施例1所記載者。 綜上所述，本發明戈氏副擬桿菌之功效在於可藉由增加帶有肺癌之個體的存活率、平均存活時間、及體重，並抑制肺腫瘤生長，達到治療肺癌之功效。 結果顯示，無論是Panc-1或BxPc-3細胞株，本發明揭示的兩種化合物，I7457與I7557，在濃度為10 化學藥物治療 μM時，均可有效地增強這些癌細胞株對放射線處理的感受力，亦即可增強放射線處理殺死癌細胞的效果。
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此外，於製備包含本發明實施例之戈氏副擬桿菌之醫藥組成物時，亦可進一步加入所屬技術領域所熟知之賦形劑、載劑、輔劑及/或食品添加劑。 且其劑型可為但不限於一噴霧氣體、一溶液、一半固態、一固態、一明膠膠囊、一軟膠囊、一錠劑、一口含片、一口香糖及/或一冷凍乾燥粉末製劑。 化學藥物治療 同時，本發明實施例之戈氏副擬桿菌或包含其他成分的醫藥組成物，亦可進一步用於製備食品、保健食品、膳食補充品或疫苗組合物。
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至於其之衍生物，6-甲基磺醯己基異硫氰酸酯(或I7557)，則可向商業實驗室(如，LKT Laboratories,Inc(St. Paul,Minnesota,USA))購買。 7.海福刀高頻超音波治療：利用經直腸超音波定位，以高溫80到90度，把攝護腺精準加溫，達到殺死癌細胞的目的。 有最低的尿失禁併發症，對勃起功能障礙的影響也最少，但有可能造成膀胱頸結疤阻塞的副作用。 當攝護腺癌出現轉移時，症狀就會變得很多樣，也讓患者更加不適。 攝護腺癌經常出現骨頭轉移，像是髖關節、脊椎骨、骨盆等處。
藉由測量有絲分裂不活化複合蛋白以及其上游調控蛋白的表現量，進一步探討I7457或I7557-誘發之有絲分裂不活化過程；上述有絲分裂不活化複合蛋白如Cdc2激酶與細胞週期素B1；而上游調控蛋白如Plk-1、Chk-1與Chk-2。 化學藥物治療2023 「化合物」、「組合物」、「活性化合物」、「藥劑」或「醫藥品」等詞在此可互相替換，且都是指當施用於一對象(人類或動物)時，能夠透過局部和/或全身性作用而誘發所欲藥學和/或生理反應的一種化合物或組合物。 化學藥物治療 一般來說，本發明化合物的含量佔整體藥學組合物重量約0.1%至99%(重量%)。 在某些實施方式中，本發明化合物的含量佔整體藥學組合物重量的至少1%(重量%)。 在特定實施方式中，本發明化合物的含量佔整體藥學組合物重量的至少5%(重量%)。
如本文中所使用的，“治療”或“治療”意指緩解、減少、改善、減輕或控制一疾病或障礙的一或多個臨床徵兆，以及降低、停止或逆轉一正在被治療中的病況或症狀之嚴重性的進展。 如本文中所使用的，用語“細菌成分”意為培養細菌時，該菌直接或間接相關之衍生物質，包括但不限於該細菌之代謝產物、該細菌之結構、細菌相關活性及非活性成分等。 如本文中所使用的，用語“代謝產物”意為培養細菌時，經該細菌代謝後所分泌至細菌培養液中之物質，包含培養該菌的培養液。 抗藥性CML細胞株之誘導將CML細胞株K562R培育於持續存有低劑量甲磺酸伊馬替尼(imatinib mesylate，亦稱為STI-571)的環境下，以得到對伊馬替尼具有抗性之細胞株。
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利用本發明實施例之戈氏副擬桿菌於治療肺癌時，可為但不限於以口服方式給藥。 其給藥時可與一般食物一同食用，因此製備包含戈氏副擬桿菌醫藥組成物時，該醫藥組成物可進一步包括蛋白質、單醣、雙醣、寡醣、低聚醣、多醣、碳水化合物、胺基酸、脂質、維他命或其任意組合的成分。 在某些實施方式中，本發明醫藥品及藥學組合物中更包含另一種已知可改善癌症治療效果的藥物。 圖6是戈氏副擬桿菌菌株MTS01在抑制肺腫瘤生長上的效用之數據圖。 由圖6可見，與正常對照組相較之下，病理對照組的肺腫瘤重量有顯著的增加。 然而，與病理對照組相較之下，實驗組的肺腫瘤重量有顯著的降低。
有鑒於此，此領域亟需一種或一類可用來治療上述具有抗藥性或是對目前化學藥物治療不敏感之癌症的有效藥學化合物。 本實施例比較組所用之迪氏副擬桿菌購自於美國典型培養物保藏中心(American Type Culture Collection，ATCC)。 使用YCFA培養基進行培養，在厭氧室中於37℃在50mL的YCFA培養基中培養24小時。 透過在4℃下以8,000×g離心10分鐘獲得細胞沉澱物。 透過將經培養的細菌細胞懸浮於無氧PBS中(具有最終細胞密度為1×109CFU)來製備用於口服投藥的細胞懸浮液。
細胞存活率分析的結果顯示，相較於對照組細胞，I7457與I7557在20μM的濃度下能夠有效地減少癌細胞數目至少70%(資料未顯示)。 細胞週期分析顯示以I7457與I7557治療後僅需24小時，即可使至少45%的細胞停滯於G2/M期，且處於亞G1群的細胞數目隨著I7457或I7557的劑量提高而增加(資料未顯示)。 至於和細胞週期相關的蛋白質，其表現量與上文針對抗藥性CML細胞所述的表現模式相似(資料未顯示)。 細胞存活率分析的結果顯示，與對照組細胞相較之下，I7457與I7557在20 μM的濃度下能夠有效地將癌細胞的數目減少至少50%(資料未顯示)。 細胞週期分析顯示以I7457與I7557治療後僅需24小時，即可使至少50%的細胞停滯於G2/M期，且處於亞G1群的細胞數目隨著I7457或I7557的劑量提高而增加(參見表2)。 此外，相較於對照組細胞(第3A圖)，經過20 μM的I7457(第3B圖)或I7557(第3B圖)處理的CML細胞開始變圓，而使其外觀呈氣球狀，這意味著CML細胞正經歷細胞凋亡與有絲分裂風暴。
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因此，本發明兩化合物，I7457與I7557，具有後續開發成抗癌藥物佐劑的潛力。 化學藥物治療2023 本實施例亦探究了另一種關鍵有絲分裂蛋白－磷酸化組蛋白H3的表現量。 組蛋白H3只有在細胞進行有絲分裂的過程中才會被磷酸化，因此若細胞停滯在有絲分裂期中，此蛋白的含量會提高。 一如預期地，在經I7457與I7557治療的抗藥性CML細胞之中，磷酸化組蛋白H3的表現量遠比對照組細胞來得高(第10圖)。
