相比之下，在所测试的所有肿瘤模型中，化合物A在单独施用时抑制肿瘤生长并延长小鼠存活。 值得注意的是，在AG104A(纤维肉瘤)肿瘤模型中，与单独施用的化合物A相比，组合治疗显示出提高的功效，表明化合物A与PD-L1抗体协同起作用。 AG104A、AG104LD、LL2和4T1细胞系的代表性数据分别显示在图4-7中。 在一个实施方案中，化合物A与PD-1抑制剂或PD-L1抑制剂联合施用以治疗转移性肿瘤。 可以在用免疫检查点抑制剂治疗之前、同时或之后施用化合物A。
在第一周期中施用的化合物A的个体剂量可以相同或不同于后续周期中施用的剂量。 例如，在第一周期中施用的个体剂量可以小于在后续周期中施用的剂量。 在特定实施方案中，化合物A可用于治疗用免疫检查点抑制疗法难治或对其无响应的癌症。 此类癌症可包括但不限于前列腺癌、胰腺癌、淋巴瘤、头颈癌、肾癌、黑素瘤、结肠癌、乳腺癌和肺癌。 脚癌 在某些实施方案中，癌症选自前列腺癌、胰腺癌、淋巴瘤、头颈癌和肾癌。
该发现与化合物A介导的炎症反应一致，该炎症反应被认为是死亡的可能原因。 存在IL-12、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)和IFNγ水平散发性增加。 然而，这些变化一般在性别之间不一致，不是剂量依赖性的，并且具有小的量级，因此被认为仅与化合物A潜在相关。 促炎细胞因子和趋化因子MCP-1和IP-10的水平的变化表明炎性反应，其到给药后24小时消退。 通过化合物A平均Cmax、AUC0-2、AUC0-8和AUC0-24值评估的暴露通常随着剂量水平在II期第1天从0.3增加至3毫克/千克/天而增加，并且通常是剂量成比例的。
在一些实施方案中，在给定给药周期中可以以比个体维持剂量少2至100倍的量(以重量计)施用引发剂量。 在一些实施方案中，在给定周期中可以以比维持剂量小2至4倍的量施用引发剂量。 在一些实施方案中，在给定周期中可以以比维持剂量小2至5倍的量施用引发剂量。
在雄性中在给药后6小时以及在雌性中在给药后3小时和6小时注意到TNFα水平升高。 在这两种情况下，在给药后24小时TNFα水平恢复到不可检测的水平。 在雄性和雌性动物中给药后3小时注意到IP-10的轻微升高。 当以0.6毫克/千克/天施用时，化合物A在雄性或雌性中没有引起血浆IFNα水平的显著增加。 在给药后3小时和6小时注意到IL-6的血浆水平增加。
在一些此类实施方案中，癌症患者先前既未接受用化合物A的疗法，也未接受用免疫检查点抑制剂的疗法。 因此，化合物A可以与癌症治疗的其它治疗方法，例如在抗肿瘤疗法、与免疫检查点抑制剂的组合疗法、其它化学治疗剂、激素、抗体药剂以及手术和/或放射治疗中一起使用。 因此，在一方面，本公开提供了治疗受试者的癌症的方法，其包括施用包含药学上可接受量的化合物A的药物组合物。 在另一方面，本公开提供了治疗受试者的癌症的方法，其包括施用包含药学上可接受量的化合物A的药物组合物。
- 在给药后3小时血液中检测到高水平的IFNβ，并且该水平随时间缓慢地降低；在给药后12小时，IFNβ水平接近BLOQ(图1，图B)。
- 在一方面，本公开提供了治疗人类癌症患者中的转移的方法，其包括向该患者施用治疗有效量的化合物A。
- 在某些实施方案中，可以根据本申请中所公开的给药周期施用免疫检查点抑制剂。
- 6.权利要求1～4中任一项所述的方法，其中所述化合物在周期指定施用的每天以100μg至3,000μg范围内的剂量施用。
- 在化合物A与免疫检查点抑制剂如PD-1抑制剂、PD-L1抑制剂和/或CTLA4抑制剂联合给药的实施方案中，免疫检查点抑制剂可以系统给药。
- 注射后15分钟检测化合物A，在5-15mM的范围内，并且在施用后1小时降低至低于检测限的水平。
在一些实施方案中，当与免疫检查点抑制剂组合使用时，化合物A的剂量将比当化合物A作为单一疗法施用时引起抗肿瘤反应所需的剂量小1.2倍至3倍。 在一些情况下，当化合物A与PD-L1抑制剂组合施用时(参见图9)，显示更少量的化合物A与更大量的化合物A等效或甚至比更大量的化合物A更有效。 结果，可以施用该组合疗法而不会在患者中引起严重的炎症反应。 在其它实施方案中，将化合物A和免疫检查点抑制剂施用于对在化合物A不存在的情况下施用的免疫检查点抑制剂的疗法无响应的癌症患者。
在一些实施方案中，化合物A的维持剂量可以以50-6,500μg范围内的剂量施用于癌症患者。 在特定实施方案中，化合物A的维持剂量可以以100-3,000μg范围内的剂量施用于癌症患者。 在其他实施方案中，化合物A的维持剂量可以以100-1,200μg范围内的剂量施用于癌症患者。
在雌性B16F10荷瘤小鼠中经肿瘤内施用后，化合物A在血浆中也是高度生物可利用的，在0.1和0.5mg/kg的剂量下，Frel值分别为105％和112％。 这表明在药理学研究之一中观察到的远位功效可能与系统利用度和化合物A对远处肿瘤的直接作用有关。 化合物A在人、大鼠、小鼠、狗和猴的体外系统中的蛋白质结合和代谢稳定性的评估显示在人中48.9％的蛋白质结合和超过120分钟的半衰期，表明CYP450系统代谢有限。 在一些实施方案中，可以在治疗周期的第1天施用引发剂量，并且此后可以以如上所述的给药方案施用维持剂量。 第一维持剂量可以在施用引发剂量后至少2天，即在第3天施用。 例如，可以在施用引发剂量后2、3、4、5、6、7、8、9或10天施用第一维持剂量。
在一个实施方案中，化合物A经肿瘤内施用且PD-1抑制剂经系统施用。 在另一个实施方案中，肿瘤内施用化合物A，系统施用PD-L1抑制剂。 在另一个实施方案中，化合物A经肿瘤内施用，并且CTLA4抑制剂经系统施用。 在另一个实施方案中，肿瘤内施用化合物A，并且系统施用PD-1抑制剂和CTLA4抑制剂二者。
在一些实施方案中，在给药周期过程中可以以比维持剂量小约15倍的剂量递送引发剂量。 在一些实施方案中，在给药周期过程中可以以比维持剂量小约20倍的剂量递送引发剂量。 在一些实施方案中，在给药周期过程中可以以比维持剂量小约50倍的剂量递送引发剂量。
在第0天，雌性C57BL6小鼠(每组5只)在其胁腹皮下植入106的B16F10黑素瘤细胞。 在第6天，测量肿瘤并将小鼠重新分组，使得每组具有相似的平均肿瘤体积(～70mm3)。 每2-3天测量了肿瘤体积，并每天监测了小鼠存活。 化合物A剂量水平的递增耐受，直到3.0毫克/千克/剂，发现限于体温升高和IFNα、IL-6和TNFα细胞因子水平升高。 脚癌2023 在给药后3、6和12小时测量了IFNα、TNFα和IL-6水平。 在给药后3小时和6小时，在1mg/kg和3mg/kg组中注意到中等水平的IFNα。
然后，STING激活信号转导级联，导致产生I型干扰素、细胞因子和其他免疫介体。 然而，现有的通过免疫检查点阻断的癌症免疫疗法仅对一小部分(平均20-30％)的癌症患者有效。 免疫检查点阻断难治的患者通常具有未发炎的肿瘤，或所谓的“冷”肿瘤细胞，即它们缺乏肿瘤浸润性白细胞，例如分化簇8T细胞，或肿瘤微环境抑制TIL的功能。 目前正在进行的癌症药物开发研究的主要推动力仍然集中在将“冷”肿瘤细胞转化为“热”肿瘤细胞，以在更广泛阵列的患者中实现更好的肿瘤控制。 脚癌2023 晚期实体瘤恶性肿瘤以及许多血液恶性肿瘤的治疗仍然由高度未满足的医疗需求来定义。
在一些实施方案中，化合物A可以按照本申请中所公开的剂量水平或特定给药方案进行施用，所述剂量水平或特定给药方案导致缩小或根除原发性肿瘤并源自原发性肿瘤的发展性转移。 如果在肿瘤从组织扩散到机体的其他部分之前施用，则化合物A还可以防止转移的形成。 脚癌 如实施例5-9和图3-10中所示，化合物A的施用在根除原发性肿瘤和发展性转移方面是高度有效的。 已经发现，在免疫检查点抑制难治的某些肿瘤中，化合物A可以与免疫检查点抑制剂一起，以小于化合物A作为单一疗法施用时治疗患者所需剂量的剂量施用。 因此，可以施用组合疗法而不会在患者中引起有害炎症反应，当作为单一疗法使用时较高剂量的化合物A可能引起该有害炎症反应。
在另一个实施方案中，肿瘤内施用化合物A，并且系统施用PD-L1抑制剂和CTLA4抑制剂。 脚癌 在另一个实施方案中，化合物A与PD-1抑制剂(或PD-L1抑制剂)和CTLA4抑制剂联合给药，以治疗通过肿瘤内给药不易接近的肿瘤。 化合物A可以在远离不能接近的肿瘤的组织中经肿瘤内施用，以便诱导远位效应。
在特定实施方案中，化合物A可以1-50μg/kg的范围施用。 脚癌 在通过皮下、肌内或静脉内给药途径给药后，在C57BL/6小鼠中评价了化合物A的药物动力学/药效学性质。 在给药后收集血液以测量血浆中化合物A和细胞因子的水平。
施用1.0毫克/千克/天(在此之前施用0.1mg/kg的引发剂量)或0.6mg/kg(没有引发剂量)的每周3次剂量是耐受的。 由于先前以允许产生耐受性的较低水平施用，在I期动物耐受递增至3.0mg/kg。 对于施用0.6或1.0毫克/千克/天的动物，化合物相关的发现限于瞬时体温升高以及轻度至中度临床和解剖病理学发现。 对小鼠皮下或肿瘤内施用后，在15分钟在循环中可检测到化合物A。 通过这些途径施用或通过静脉内施用的化合物A的水平到1小时低于定量限。
在一些实施方案中，化合物A可与PD-L1抑制剂、PD-1抑制剂或CTLA-4抑制剂或其组合一起施用。 例如，化合物A可以与PD-L1抑制剂和CTLA-4抑制剂二者、与PD-1抑制剂和CTLA-4抑制剂二者或与PD-L1抑制剂和PD-1抑制剂二者一起施用。 图1显示了化合物A施用于小鼠后化合物和IFNβ的血液水平。
图4显示了化合物A对AG104A纤维肉瘤的研究结果。 图4的图A显示了皮下施用化合物A(单独施用或与PD-L1抗体组合施用)对AG104A(纤维肉瘤)模型的肿瘤收缩作用。 图4的图B显示了在AG104A(纤维肉瘤)模型上皮下施用化合物A(单独施用或与PD-L1抗体组合施用)后小鼠的存活百分比。 图4的图C显示了直至第19天肿瘤生长数据的统计分析。 已经发现，化合物A可以局部和系统产生作用以发挥强大的抗肿瘤作用。 当以特定剂量向有需要的癌症患者施用时，化合物A能够基本上减少或预防转移的扩散。
抑制抗肿瘤免疫的负因子包括免疫检查点蛋白，如细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA-4)、程序性细胞死亡-1(PD-1)和程序性死亡配体1(PD-L1)。 免疫-肿瘤学方法，其包括针对这些检查点蛋白的抗体，已经在几种类型的人类癌症中显示出显著的功效。 38.权利要求37所述的方法，其中在根据所述给药方案施用所述化合物之前所述患者经历了至少1个周期的免疫检查点抑制剂疗法。 远位效应是一种免疫介导的现象，其中原发性肿瘤的直接治疗可导致远处肿瘤的反应。 在B16黑素瘤和AG104A纤维肉瘤肿瘤模型中评估了化合物A的潜在远位效应，该模型评估在右胁腹(原发性肿瘤)和左胁腹(继发性肿瘤)二者上携带肿瘤的小鼠。
8.权利要求1～4中任一项所述的方法，其中所述化合物在周期指定施用的每天以100μg至500μg范围内的剂量施用。 7.权利要求1～4中任一项所述的方法，其中所述化合物在周期指定施用的每天以100μg至1,200μg范围内的剂量施用。 脚癌 脚癌 6.权利要求1～4中任一项所述的方法，其中所述化合物在周期指定施用的每天以100μg至3,000μg范围内的剂量施用。
在一些实施方案中，在给定周期中可以以比维持剂量小2至8倍的量施用引发剂量。 在一些实施方案中，在给定周期中可以以比维持剂量小3至5倍的量施用引发剂量。 在一些实施方案中，在给定周期中可以以比维持剂量小3至8倍的量施用引发剂量。 在一些实施方案中，在给定周期中可以以比维持剂量小4至8倍的量施用引发剂量。 在另一个实施方案中，给药周期包括在四周给药方案的第1天和第15天(即，每两周)施用化合物A。 随后的周期可以依赖于相同的给药方案或不同的给药方案。
在一方面，本公开提供了治疗人类癌症患者中的转移的方法，其包括向该患者施用治疗有效量的化合物A。 脚癌 脚癌 虽然细胞因子产生对于产生抗肿瘤免疫是必需的，但是高细胞因子水平具有安全性担忧。 具体而言，高细胞因子水平可以在经历免疫疗法的癌症患者中引起炎症反应。 在其它调节免疫系统的化合物(例如免疫检查点抑制剂)存在的情况下炎症反应可被增强。 因此，开发毒理学上可接受的抗肿瘤免疫疗法治疗癌症是需要进一步进展的重要目标。 使用B16黑素瘤肺转移模型评价了化合物A对肿瘤转移的作用。
因此，化合物A和免疫检查点抑制剂的组合在治疗晚期肿瘤，特别是转移性肿瘤或已经在机体的继发器官中建立的肿瘤中特别有效。 癌症的不可触及的出现可以是对于肿瘤内施用而言不能容易地接近的肿瘤块或发展性转移。 在具体实施方案中，如下所讨论，化合物A与免疫检查点抑制剂组合施用。 脚癌 图3的图A-C显示了肿瘤内施用各种浓度的化合物A(单独施用或与PD-L1抗体组合施用)对B16黑素瘤的肿瘤收缩作用。 数字表示使用双因素ANOVA(方差分析)获得的每个比较组之间的p值。
在这两种模型中，在肿瘤接种后第5天、第8天、第11天和第15天将化合物A经肿瘤内施用到原发性肿瘤中。 在0.15mg/kg(或3微克/小鼠)和0.5mg/kg(或10微克/小鼠)的剂量下，原发性肿瘤和远处肿瘤二者中的肿瘤生长均被抑制，并且存活显著延长。 在其它实施方案中，在患者接受免疫检查点抑制剂(例如，PD-1抑制剂或PD-L1抑制剂)之前，将化合物A施用于该癌症患者。 例如，在接受免疫检查点抑制剂之前，如本申请中所公开的，患者可以接受1至10个给药周期的化合物A。
在这样的实施方案中，当在化合物A不存在的情况下施用时，免疫检查点抑制剂不能减缓或停止肿瘤的生长(进展)或降低与所治疗的癌症相关的特定肿瘤生物标志物的水平。 例如，化合物A可用于治疗免疫检查点疗法难治的或甚至完全抵抗免疫检查点疗法的原发性或转移性肿瘤。 如实施例中所示，化合物A能够使这些抗性癌症对免疫检查点疗法敏感。 如图3-10中所示，显示有限响应的肿瘤和对PD-L1抑制完全无响应的肿瘤可用化合物A治疗。 令人惊讶的是，对于这些对PD-L1抑制无响应的肿瘤，施用PD-L1抑制剂增强了化合物A的抗肿瘤作用。 在一个实施方案中，化合物A与免疫检查点抑制剂联合使用以治疗癌症。
